Questões de Concursos Públicos - UFRJ

Assinale a alternativa que apresenta e descreve corretamente o método utilizado para introduzir plasmídeos em células de bactéria E.coli no laboratório.

É necessário confirmar se um gene de 1000 nucleotídeos está corretamente clonado num plasmídeo que, vazio, apresenta 5000 nucleotídeos. O gene foi inserido usando as enzimas de restrição NdeI e BamHI. Decidiu-se usar as enzimas PvuI e EcoRI para verificar a clonagem. Considere o mapa de restrição a seguir: Mapa de restrição do Plasmídeo vazio 5000 pb:    Mapa de restrição do gene 1000 pb:   Assinale a alternativa que apresenta o resultado previsto para uma clonagem bem sucedida. 

Trabalha-se na expressão de uma proteína fusionada a uma cauda de poli-histidina. A purificação será pelo método de cromatografia por afinidade em resina conjugada ao níquel. Considerando o principio de interação desse método de purificação, assinale a alternativa INCORRETA.

Assinale a alternativa que apresenta corretamente as vantagens e/ou desvantagens da expressão de proteínas heterólogas em Pichia pastoris.

Assinale a alternativa que descreve corretamente as propriedades de um vetor de expressão de proteínas heterólogas. 

Assinale a alternativa que apresenta características dos vetores de expressão baseados em baculovírus.

Trabalha-se na purificação de uma proteína de 50 kDa. Após uma etapa de precipitação por sulfato de amônio, foi constatada a presença de uma proteína contaminante de 10 kDa. Dos métodos listados a seguir, assinale aquele que é adequado para separação em larga escala.

Um laboratório quer expressar a amilase salivar de bovinos para fins biotecnológicos. Assinale a alternativa que indica como o isolamento do gene pode ser feito. 

Muitos plasmídeos de expressão em E. coli têm expressão controlada pela adição de IPTG (Isopropil-β-D-1-tiogalactopiranósido) ao meio de cultura. Sobre esse método de indução, assinale a alternativa INCORRETA.

O método de Sanger baseia-se em uma reação de sequenciamento com utilização de terminadores de cadeia (didesoxinucleotídeos, ddNTPs) marcados com fluorescência, além de nucleotídeos naturais (dNTPs). Originalmente, o produto da reação era submetido a uma eletroforese em gel de poliacrilamida que permitia realizar a leitura da sequência inicial de DNA. Atualmente, a eletroforese é feita em capilar dentro dos sequenciadores automáticos. Sobre o método, assinale a opção correta.