Questões de Concursos Públicos - Biologia

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Q71645 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Trabalha-se na expressão de uma proteína fusionada a uma cauda de poli-histidina. A purificação será pelo método de cromatografia por afinidade em resina conjugada ao níquel. Considerando o principio de interação desse método de purificação, assinale a alternativa INCORRETA.

A É adequado o uso de tampões com valores de pH, variando de 2-8.

B O uso de inibidores de protease é adequado, desde que não contenham EDTA e a eluição não dependa de clivagem proteolítica.

C A concentração de imidazol no tampão de ligação pode ser otimizada para prevenir interações inespecíficas.

D O método é compatível com tampões desnaturantes contendo altas concentrações de uréia.

E A eluição da proteína de interesse pode ser feita com um tampão contendo alta concentração de imidazol.

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Q71644 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Assinale a alternativa que apresenta corretamente as vantagens e/ou desvantagens da expressão de proteínas heterólogas em Pichia pastoris.

A É um organismo capaz de reproduzir, sempre fielmente, o padrão de glicosilação observado em células de mamífero.

B Por ser uma bactéria, o meio de cultura é mais econômico que o utilizado na expressão em células de mamífero.

C Na expressão induzida por metanol, não é necessário que a cultura seja bem oxigenada, já que esse é um processo anaeróbio.

D É possível fazer a clonagem pelo processo de recombinação homóloga que permite a inserção de cassetes de expressão no DNA genômico.

E Como possui parede celular, a proteína é sempre retida na célula, portanto o processo de purificação é mais trabalhoso.

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Q71643 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Identidade dos seres vivos

Assinale a alternativa que descreve corretamente as propriedades de um vetor de expressão de proteínas heterólogas.

A Os plasmídeos de expressão em E. coli contêm um mesmo promotor para indução do gene de seleção e do gene heterólogo.

B Plasmídeos de expressão em E. coli possuem sítios múltiplos de clonagem, que devem estar entre o promotor indutível e a sequência Shine-Dalgarno.

C Geralmente contém uma abundância de sítios de restrição que podem ser escolhidos livremente para clonagem, desde que o gene heterólogo contenha um códon de iniciação e de parada da tradução.

D Plasmídeos de expressão em células de mamífero que são destinados à integração no genoma requerem origem de replicação derivado de vírus, como SV40 ou Epstein-barr.

E Alguns plasmídeos de expressão em células de mamífero podem ser propagados em E. coli, mas não em células de mamíferos.

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Q71642 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Identidade dos seres vivos

Assinale a alternativa que apresenta características dos vetores de expressão baseados em baculovírus.

A É um vetor lentiviral utilizado em células eucarióticas.

B São vetores de expressão classicamente utilizados em células de inseto, mas que podem ser adaptados para expressão em células de mamíferos.

C É obrigatoriamente dependente de mecanismos de seleção, como resistência a antibióticos ou marcadores auxotróficos.

D Utiliza o promotor forte da poliedrina, que é derivado de células de insetos.

E Por serem pequenos vírus de RNA, não comportam insertos com mais de 500 pb.

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Q71641 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Trabalha-se na purificação de uma proteína de 50 kDa. Após uma etapa de precipitação por sulfato de amônio, foi constatada a presença de uma proteína contaminante de 10 kDa. Dos métodos listados a seguir, assinale aquele que é adequado para separação em larga escala.

A SDS-PAGE.

B Espectrometria de massas.

C Ultracentrifugação contra colchão de sacarose.

D Cromatografia por gel filtração.

E Eletroforese em gel de agarose.

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Q71640 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Um laboratório quer expressar a amilase salivar de bovinos para fins biotecnológicos. Assinale a alternativa que indica como o isolamento do gene pode ser feito.

A A saliva é coletada e incubada com enzimas de restrição específicas para a clonagem do gene da amilase salivar no plasmídeo de interesse.

B A saliva é coletada, o material genético total é extraído e incubado com a enzima ligase na presença do plasmídeo de interesse.

C É feito um extrato do tecido animal e a proteína de interesse é isolada por técnicas bioquímicas.

D O material genético é extraído do tecido animal e é utilizada a técnica de RT- PCR com iniciadores específicos, para amplificar a sequência da amilase salivar.

E É feita a cultura de células da glândula salivar e o DNA nuclear contendo o gene de interesse é transferido para a bactéria.

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Q71639 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Muitos plasmídeos de expressão em E. coli têm expressão controlada pela adição de IPTG (Isopropil-β-D-1-tiogalactopiranósido) ao meio de cultura. Sobre esse método de indução, assinale a alternativa INCORRETA.

A A indução controlada é importante para prevenir efeitos tóxicos da proteína de interesse.

B O IPTG é um análogo da lactose que não é metabolizado pelas células.

C O IPTG age induzindo a replicação do gene de interesse.

D O IPTG age sobre promotores controlados pelo repressor lacI.

E Em plasmídeos com o promotor T7, o IPTG induz a expressão da polimerase T7 presente em bactérias da linhagem DE3.

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Q71638 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

O método de Sanger baseia-se em uma reação de sequenciamento com utilização de terminadores de cadeia (didesoxinucleotídeos, ddNTPs) marcados com fluorescência, além de nucleotídeos naturais (dNTPs). Originalmente, o produto da reação era submetido a uma eletroforese em gel de poliacrilamida que permitia realizar a leitura da sequência inicial de DNA. Atualmente, a eletroforese é feita em capilar dentro dos sequenciadores automáticos. Sobre o método, assinale a opção correta.

A A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com dois iniciadores por reação e uma mistura de nucleotídeos dNTPs e ddNTPs, onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs, e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

B A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os dNTPs encontram-se em maior quantidade do que os ddNTPs e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

C A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de baixo para cima no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente) após a eletroforese.

D A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com dois iniciadores por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

E A reação de sequenciamento de Sanger é realizada com apenas um iniciador por reação e uma mistura de nucleotídeos (dNTPs) e didesoxinucleotídeos (ddNTPs), onde os ddNTPs encontram-se em maior quantidade do que os dNTPs e a leitura da sequência é realizada de cima para baixo no gel de poliacrilamida (sentido 5’-3’ da fita nascente), após a eletroforese.

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Q71637 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta.

A Uma das técnicas utilizadas é o PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e o PCR realizado através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454.

B Uma das técnicas utilizadas é o PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e o PCR realizado através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Ion Torrent.

C A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Ion Torrent e consiste de uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma “bead” para sua ancoragem.

D A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste de uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma “bead” para sua ancoragem.

E A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma “bead” para sua ancoragem.

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Q71636 PR-4 UFRJ - 2016 - UFRJ - Biólogo - Biologia Molecular

Ano: 2016

Órgão: UFRJ

Banca: PR-4 UFRJ

Matéria: Biologia

Assunto: Moléculas, células e tecidos

Sobre o PCR em tempo real ou PCR quantitativo (qPCR), assinale a alternativa INCORRETA.

A O PCR em tempo real é mais sensível do que o PCR tradicional, devido a seu método de detecção da amplificação.

B Uma curva de fluorescência de PCR em tempo real pode ser dividida em 3 fases: exponencial, linear e de plateau. A quantificação da amostra deve ser realizada na fase linear.

C A eficiência da amplificação de duas amostras com sequências conservadas com os mesmos reagentes de PCR quantitativo deve ser teoricamente igual.

D O Ct de uma reação de amplificação é um dos parâmetros utilizados para a quantificação das amostras.

E A detecção da fluorescência do Sybr-green (detecção inespecífica) deve ser feita durante a fase de extensão da reação de qPCR.

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